磁珠法核酸提取是現在常用的DNA提取手段，它有著檢測靈敏度高、可自動化操作、安全且快速等特點，在生物檢測中得到了廣泛應用。但是在核酸提取過程中，經常也會有這種問題出現，今天慧慶小編就為大家介紹磁珠法核酸提取常見的問題及解決辦法。

  磁珠法核酸提取常見的問題及解決辦法

  1、裂解效果不好

  出現這種情況，多數屬由于裂解液出現問題導致的。有人會想要用增加裂解液使用量的方式來解決，但是在磁珠法核酸提取過程中，隨著裂解液體積的增大，磁珠與核酸碰撞幾率降低，磁珠吸附核酸效率降低，可能導致核酸提取量降低、核酸提取純度降低等問題。增加裂解液使用量帶來的負面影響往往大于正面。

  如果裂解效果不好，可以調整裂解液的配方、裂解方式、裂解時間或是減少樣品量等來進行解決。

  2、核酸降解

  出現這種情況多數原因是由于樣品的反復凍融，其次也可能是由于在提取過程中剪切力、磁珠表面不均勻、洗脫溫度過高和提取流程時間過長導致的。解決辦法就是避免樣品反復凍融，以及操作過程中出現的問題。

  3、核酸純度不高

  核酸提取純度不高，主要污染原因為蛋白及（或）鹽類殘留。可在提取過程中加入蛋白酶K降解樣品中的蛋白，減少蛋白殘留污染，同時用高濃度有機溶劑對核酸進行清洗，減少鹽殘留對酶活的抑制。

  4、提取的核酸得率低

  將樣品量與試劑配比控制在合理的范圍內，避免超過裂解能力。其次在洗脫的步驟，使用足量的洗脫液洗脫并充分混勻，避免有團塊殘存；實驗耗材要匹配，如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同，也會影響核酸的得率。

  5、磁珠結團

  磁珠結團是核酸提取過程中經常遇到的現象，尤其手工操作時，這是由磁珠本身特性和磁珠所處試劑環境兩方面造成的，有些磁珠不僅在全血DNA提取過程中會結團，其他的樣本也同樣會結團，其實結團現象可以用來提前預判實驗結果，結團往往是吸附了大量核酸，如果哪次實驗沒有結團，本次的實驗結果或許會不太好，不過也不能一概而論，雜質太多也是引起磁珠結團的原因。通過修改試劑配方，優化試劑用量，可以改善磁珠的結團現象，這就需要對各種參數進行調整。

  關于磁珠法核酸提取常見的問題及解決辦法，以上就是慧慶小編帶來的相關介紹，希望能夠對您有所幫助。洛陽慧慶生物科技有限公司研發生產有不同規格高品質的核酸提取試劑，如果您有相關需求，歡迎來電咨詢或者在網站留言給我們。