核酸提取是生物學試驗的重要步驟,想要對生物的核酸進行檢測,就要先從生物樣本中提取出核酸,而核酸提取試劑盒就是專用于核酸提取的試劑。很多人都不太了解核酸提取試劑盒的工作原理,今天慧慶小編就為大家介紹這類試劑盒的工作原理與操作步驟。
一、核酸提取試劑盒的工作原理
1、磁珠法核酸提取試劑盒
磁珠法核酸提取試劑有著提取速度快、得率高、純度高的特點,是目前被廣泛推廣使用的核酸提取試劑。其工作原理是利用生物磁珠高活性的表面基團與生物樣本中的核酸進行特異性識別和快速結合,接著再利用生物磁珠的超順磁性,加入變性劑(如:鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外磁場的作用下,將核酸從生物樣本中分離出來,采用此種方法提取出來的核酸可以用于分子生物學研究、臨床疾病診斷、法醫學鑒定、輸血安全等多種領域。
2、離心柱法核酸提取試劑盒
這類試劑盒的工作原理是將對核酸有吸附作用的官能基團固定在離心柱模上,然后加入不同的裂解試劑、洗滌試劑并反復離心,將核酸與雜質分離,獲得純化的核酸。
二、核酸提取試劑盒的操作步驟
1、磁珠法核酸提取試劑盒
先使用裂解液破壞細胞結構,使得生物樣本中的核酸能夠充分游離出來,然后加入磁珠結合液,讓核酸與磁珠能夠充分結合,接著加入洗滌液,多次洗滌去除殘留的雜質,然后加入洗脫液,分離核酸與磁珠,得到高質量的核酸溶液。
2、離心柱法核酸提取試劑盒
先加入含有高濃度離液鹽的裂解緩沖液,再加入消化緩沖液,使蛋白質變性、消化,暴露DNA,恒溫孵育幾分鐘,然后加入試劑沉淀DNA,接著將其轉移到吸附柱以后經過高速離心或者負壓法的操作,核酸會特異地吸附到硅膠膜上。接著加入漂洗液,在高速離心以后雜質會被甩出離心柱。之后加入洗脫液,把硅膠模上吸附的核酸洗脫下來,在高速離心之后就可以得到純化的核酸溶液。
關于核酸提取試劑盒的工作原理與操作步驟,以上就慧慶小編帶來的相關介紹,希望能夠對您有所幫助。目前常用的兩種核酸提取試劑盒,磁珠法與離心柱法都有著各自的優勢,使用者可以根據自身需求進行選擇。如果您還有其他疑問,歡迎隨時來電咨詢洛陽慧慶生物科技有限公司,我們會及時解答您的疑惑。